miRNA沉默VCP对骨肉瘤细胞U2-OS增殖和迁移的影响
龙新华1
刘志礼1
黄山虎1
毛建华1
王高2
周扬1
1.南昌大学第一附属医院骨科,南昌,3300062.南昌大学第三附属医院骨科,南昌,330006
摘要:目的 探讨沉默VCP基因对人骨肉瘤细胞系增殖、迁移的影响.方法 构建靶向VCP 基因的重组质粒载体(X135-1-2、X135-2-1、X135-3-1)和阴性对照载体(Negative),测序鉴定;X135-1-2、X135-2-1、X135-3-1分别转染人骨肉瘤细胞系U2-OS(阳性干扰组:X135-1-2组、X135-2-1组、X135-3-1组),Negative质粒转染为阴性对照组,未转染细胞为空白对照组.RT-PCR检测VCP mRNA的表达水平,Western blot测定VCP的蛋白表达水平,MTT检测细胞的增殖情况,Transwell migration实验检测细胞迁移力.结果 转染后48 h,与空白对照组和阴性对照组比较,X135-1-2、X135-2-1和X135-3-1组VCP mRNA和蛋白的表达均明显降低,尤以X135-3-1组更为显著[VCP mRNA和蛋白表达抑制效率分别为(81.4±3.0)%和(83.3±6.0)%];各阳性干扰组细胞的增殖能力均被明显抑制,以X135-3-1组更为显著(P<0.05);各阳性干扰组细胞的迁移能力明显下降,以X135-3-1组更为显著(P<0.05).结论 沉默VCP能有效抑制人骨肉瘤细胞系U2-OS细胞的增殖和迁移,VCP可能是骨肉瘤治疗的分子靶点.
关键词:基因沉默VCP骨肉瘤增殖迁移
资助基金:江西省教育厅科学技术研究项目(GJJ11316)
论文发表日期:2013-05-17
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:5( 1481-1485 )
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