TP17蛋白的重组表达及其在梅毒血清学诊断中的初步应用
俞辉
林勇平
张婷
侯剑辉
何丽斯
刘忠民
1.广州医学院第一附属医院检验科,广州,5101202.广州医学院第一附属医院检验科,广州,5101203.广州医学院第一附属医院检验科,广州,5101204.广州医学院第一附属医院检验科,广州,5101205.广州医学院第一附属医院检验科,广州,5101206.广州医学院第一附属医院检验科,广州,510120
摘要：目的 通过基因工程技术获得梅毒重组蛋白TP17,并探索其在梅毒血清学诊断中的初步应用.方法 以PCR扩增获得TP17基因,构建pET28b-TP17原核表达载体,将其转化到大肠杆菌BL21中,以IPTG诱导蛋白表达,重组蛋白经镍柱纯化后,以飞行时间质谱和免疫印迹法进行鉴定.建立基于TP17的ELISA间接法,通过检测临床患者的血清标本,评价其与化学发光微粒子免疫分析法(CMIA)和梅毒螺旋体明胶凝集试验(TPPA)的检测符合率.结果 成功构建了原核表达载体pET28b-TP17,重组蛋白TP17以包涵体形式存在,分子量约20 kD.质谱和免疫印迹分析表明重组蛋白为梅毒蛋白TP17,并且能够与梅毒阳性血清发生特异性反应.基于TP17的ELISA法与CMIA法和TPPA法的符合率均为99.2%(125/126),3种方法检测梅毒特异性抗体的差异无统计学意义.结论 基因工程技术获得的重组蛋白TP17能够与梅毒阳性血清发生特异性反应,有良好的临床应用前景.
关键词：梅毒TP17基因工程酶联免疫吸附试验
资助基金：广东省医学科研基金立项项目(A2012246)
论文发表日期：2013-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：3( 1490-1492 )