人pcsk9基因原核表达载体的构建及诱导表达
李风梅
俞辉
宋金龙
刘忠民
1.广州医科大学第一附属医院检验科,广州,5101202.广州医科大学第一附属医院检验科,广州,5101203.广州医科大学第一附属医院检验科,广州,5101204.广州医科大学第一附属医院检验科,广州,510120
摘要：目的 构建人前蛋白转化酶枯草溶菌素9(pcsk9)的原核表达载体,优化pcsk9诱导表达条件.方法 聚合酶链式反应扩增人工合成的pcsk9 cDNA序列.扩增产物经双酶切、连接,构建pET-28b-pcsk9表达载体;将重组质粒转化入大肠杆菌表达菌BL21(DE3)的感受态细胞中,分别在不同条件下对其进行诱导,获得pET-28b-pcsk9的最佳诱导表达条件.结果 成功构建了pET-28b-pcsk9重组表达载体,其最佳表达条件为菌液光密度值取0.6,诱导温度取30℃,诱导剂终浓度取1.0 mmol/L,诱导时间取8 h.结论 该重组表达载体构建成功,在大肠杆菌表达菌BL21(DE3)中可有效地表达,对诱导所用的温度和时间相对比较敏感.
关键词：人前蛋白转化酶枯草溶菌素9表达载体诱导表达优化条件
资助基金：广州市属高校科研项目(10A259)
论文发表日期：2013-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 1657-1660 )