家蝇Defensin基因原核表达条件的优化及其抑菌活性
许琴英1
朱家勇2
金小宝2
徐建华2
1.广东医学院寄生虫学暨临床寄生虫检验学教研室,广东湛江,5240232.广东省生物活性药物研究重点实验室,广州,510006
摘要：目的 优化家蝇Defensin基因原核表达条件,并初步研究其抑菌活性.方法 Defensin基因成熟肽被克隆入pGEX-4T-1原核表达载体中,构建重组质粒pGEX-4T-1/Defensin,并转化宿主菌后诱导表达,表达过程中对菌液起始浓度、IPTG浓度、诱导温度和时间进行优化.采用亲和层析法分离纯化融合蛋白,SDS-PAGE鉴定目的 蛋白的表达情况和分子量.用凝血酶切除谷胱甘肽标签,并通过体外抑菌实验检测其抗菌活性.结果 成功构建重组质粒pGEX-4T-1/Defensin,目的 基因能够在大肠埃希菌内高效表达,分子量为4 kD,与预期值一致,表达量约达40%.抑菌实验显示其对大肠埃希菌K12D31生长有一定的抑制作用.结论 本实验为家蝇Defensin基因功能的深入研究奠定了工作基础.
关键词：抗菌肽表达活性Defensin
论文发表日期：2013-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 2458-2461 )