人剪切修复基因 XPD 对肝癌细胞 P53和 Ets -1基因的作用
田明1
游春娇2
张吉翔1
1.南昌大学第二附属医院消化内科 南昌3300062.南昌大学第二附属医院心内科 南昌330006
摘要:目的:探讨人剪切修复基因XPD对肝癌细胞P53和Ets-1基因的影响。方法使用脂质体瞬时转染技术,将pEGFP-N2-XPD重组质粒转染至肝癌细胞HepG2,24 h后加入20μmol/L的P53抑制剂Pifithrin-α,孵育24 h,并以未经转染的HepG2细胞作为空白对照。 RT-PCR、Western blot 检测细胞中XPD、P53、phospho -P53(ser-15)、Ets-1的mRNA和蛋白的表达变化,MTT法观察细胞增殖的活力,流式细胞仪检测细胞周期变化。结果与空白对照比较,转染pEGFP-N2-XPD重组质粒后,HepG2细胞XPD、P53 mRNA和蛋白表达上调( P<0.01),而Ets-1 mRNA和蛋白表达下调(P<0.01),加入Pifithrin-α后,XPD、P53 mRNA和蛋白表达下调,Ets-1 mRNA和蛋白表达上调( P<0.01)。转染pEGFP-N2-XPD重组质粒后,HepG2细胞进入S期发生阻滞,停滞在G1期(P<0.01),加入Pifithrin-α后,HepG2细胞G1期细胞减少,S期细胞增多(P<0.01)。转染pEGFP-N2-XPD重组质粒后,HepG2细胞增殖活力下降( P<0.01),加入Pifithrin-α后, HepG2细胞增殖活力上升( P<0.01)。结论野生型XPD基因在转染至肝癌HepG2细胞后,可以上调P53的表达,通过P53途径抑制Ets-1的表达,促使肝癌细胞凋亡。
关键词:肝肿瘤人着色性干皮病D组基因转染P53基因原癌基因蛋白质Ets-1
资助基金:国家自然科学基金(30360037)
论文发表日期:2014-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:5( 1149-1153 )
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广东医学

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ISSN:1001-9448
年,卷(期):2014,(8)
所属栏目:基础研究