慢病毒介导HGF-ShRNA干扰肝细胞生长因子表达对肝星状细胞凋亡的影响
张君红1
姜海行2
覃山羽2
陶霖2
韦柳萍2
黄小丽2
1.广西医科大学第一附属医院老年消化内科 5300212.广西医科大学第一附属医院消化内科 530021
摘要：目的 观察慢病毒介导的HGF-ShRNA部分干扰大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)及肝星状细胞(HSCs)来源的肝细胞生长因子(HGF)表达,对BMSCs与HSCs共培养体系中HSCs凋亡的影响,探讨两种细胞来源的HGF对HSCs凋亡的促进作用.方法 应用6孔培养板,建立BMSCs及HSCs双层细胞共培养体系,实验分4组:(1)HSCs单独培养组:HSCs单独培养;(2) BMSCs+ HSCs共培养组:BMSCs与HSCs共培养;(3)BMSCs转染共培养组:使用慢病毒介导的HGF-ShRNA转染BMSCs后与HSCs共培养;(4)HSCs转染共培养组:使用慢病毒介导的HGF-ShRNA转染HSCs后与BMSCs共培养.分别于培养24、48、72 h后,采用Annexin V-FITC/PI双染法检测各组HSCs凋亡率,Western blot、荧光定量PCR分别检测各组DR5、Caspase-8蛋白及mRNA的表达.结果 BMSCs+ HSCs共培养组HSCs的凋亡率明显高于HSCs单独培养组和BMSCs转染共培养组,且呈时间依赖性(P＜0.01),而与HSCs转染共培养组比较差异无统计学意义(P＞0.05);BMSCs+ HSCs共培养组HSCs中DR5、Caspase-8蛋白及mRNA表达量均明显高于HSCs单独培养组及BMSCs转染共培养组(P＜0.01),而与HSCs转染共培养组比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 BMSCs旁分泌HGF通过上调HSCs的DR5、Caspase-8的表达促进HSCs的凋亡.HSCs自分泌的HGF在共培养体系中促进其凋亡的作用甚少.
关键词：骨髓间充质干细胞肝星状细胞肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体肝细胞生长因子死亡受体5
资助基金：广西自然科学基金(2012GXNSFAA053091)
论文发表日期：2014-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 2976-2979 )
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