miR-9对骨性关节炎细胞凋亡的影响及与protogenin的靶向关系
张彦秋1
张永涛2
1.西安石油大学体育系 西安7100652.西安交通大学第二附属医院骨一科 西安710004
摘要：目的 探讨miR-9对骨性关节炎细胞凋亡的影响及与protogenin(PRTG)的靶向关系.方法 比较miR-9在正常和骨性关节炎软骨细胞中的表达情况,构建pre-miR-9、PRTG野生型(PRTG-WT)和突变型(PRTG-MT)真核表达载体,采用实时定量PCR(qRT-PCR)检测miR-9在骨性关节炎细胞中的转染效率,采用Annexin V-FITC检测过表达的miR-9对骨关节炎软骨细胞凋亡的影响,并采用双荧光素酶报告基因、qRT-PCR和Western blot检测验证miR-9与PRTG的靶向关系.结果 qRT-PCR显示miR-9在关节炎细胞中的表达较正常软骨细胞明显下调(P =0.009);成功构建pcDNATM6.2-pre-miR-9、pmirGLO-PRTG-WT和pmir-GLO-PRTG-MT真核表达载体,qRT-PCR显示pre-miR-9转染骨关节炎软骨细胞后miR-9的表达明显上调(P =0.003).Annexin V-FITC检测显示miR-9过表达能够显著抑制骨关节炎细胞的凋亡率(P=0.03);双荧光素酶报告基因显示共转染pre-miR-9和PRTG-WT的关节炎软骨细胞的荧光活性明显下降(P ＜0.001).此外,qRT-PCR和Western blot检测显示miR-9过表达可以显著下调PRTG的mRNA(P=0.005)和蛋白(P=0.002)表达水平.结论 miR-9过表达可能通过靶向下调PRTG的表达进而抑制骨性关节炎软骨细胞的凋亡.
关键词：骨性关节炎miR-9protogenin凋亡
资助基金：陕西省体育局常规课题(13044)
论文发表日期：2014-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 3313-3316 )
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