高迁移率族蛋白 B1对内皮细胞通透性的影响
郭晓华
吴洁
翁洁
张伟金
周晓燕
王伟菊
黄巧冰
姜勇
徐静
1.南方医科大学基础医学院病理生理学教研室 广东省医学休克微循环重点实验室 广州5105152.南方医科大学基础医学院病理生理学教研室 广东省医学休克微循环重点实验室 广州5105153.南方医科大学基础医学院病理生理学教研室 广东省医学休克微循环重点实验室 广州5105154.南方医科大学基础医学院病理生理学教研室 广东省医学休克微循环重点实验室 广州5105155.南方医科大学基础医学院病理生理学教研室 广东省医学休克微循环重点实验室 广州5105156.南方医科大学基础医学院病理生理学教研室 广东省医学休克微循环重点实验室 广州5105157.南方医科大学基础医学院病理生理学教研室 广东省医学休克微循环重点实验室 广州5105158.南方医科大学基础医学院病理生理学教研室 广东省医学休克微循环重点实验室 广州5105159.南方医科大学基础医学院病理生理学教研室 广东省医学休克微循环重点实验室 广州510515
摘要：目的：研究高迁移率族蛋白B1（ HMGB1）对内皮细胞通透性的影响，以及HMGB1受体（ RAGE）和p38 MAPK通路在此病理过程中的作用。方法 HMGB1（200 ng／mL）与人脐静脉内皮细胞株分别在体外共同培养0、3、6、12和24 h，以0 h为对照检测HMGB1诱导单层内皮细胞通透性Pd改变的时间效应；用电阻法分别在0、3、6、12和24 h测量正常空白对照组（单纯培养基）和HMGB1组（200 ng／mL）的单层内皮细胞电阻值TER，比较两组间在相同时间点电阻值的差别；p38 MAPK抑制剂SB203580（25μmol／L）预先作用1 h，继以HMGB1（200 ng／mL）作用12h，比较不同组间细胞通透性的变化；以HMGB1（200 ng／mL）分别作用0、10、20、30、60 min后观察细胞内p38蛋白表达及磷酸化p38表达的时间效应；转染siRNA下调RAGE表达，或以原代培养野生型和RAGE（－／－）小鼠肺微血管内皮细胞培并继以HMGB1刺激，比较各组细胞内磷酸化p38蛋白表达的变化。通透性检测采用FITC荧光标记右旋糖酐漏出法及跨内皮电阻（ TER）测定法，蛋白表达用免疫印迹法检测。结果 HMGB1以时间依赖的方式引起单层内皮细胞通透性Pd的升高，12 h与0 h相比，差异有统计学意义（ P＜0.05）；且可使跨细胞电阻TER降低，在12 h与空白对照组相应时间点相比，差异有统计学意义（ P＜0.05）；也可引发p38蛋白磷酸化水平的升高，与0 min相比，差异有统计学意义（ P＜0.05）；SB203580预处理再以HMGB1刺激后细胞通透性明显降低，与HMGB1单纯刺激组相比，差异有统计学意义（P＜0.05）；RAGE siRNA转染后以HMGB1刺激细胞p38磷酸化水平显著下调，与HMGB1组相比，差异有统计学意义（ P＜0.05）；HMGB1刺激野生型小鼠PMVECs可诱导p38磷酸化，而RAGE（－／－）小鼠PMVECs则无此效应（ P＜0.05）。结论 HMGB1通过结合RAGE来激活p38诱导血管内皮细胞通透性的增高。
关键词：高迁移率族蛋白B1晚期糖基化终产物受体小鼠肺微血管内皮细胞内皮细胞通透性p38 MAPK
资助基金：国家自然科学基金(31300950)高等学校博士学科点专项科研基金(20124433120011)
论文发表日期：2015-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 2479-2483 )
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