ERG 基因3′端非翻译区荧光素酶报告载体的构建及其活性
徐学虎
黎淑玲
徐远东
吴小兵
伍尚标
陈戎
1.广州医科大学附属第三医院胃肠外科 广州5101502.广州医科大学附属第三医院胃肠外科 广州5101503.广州医科大学附属第三医院胃肠外科 广州5101504.广州医科大学附属第三医院胃肠外科 广州5101505.广州医科大学附属第三医院胃肠外科 广州5101506.广州医科大学附属第三医院胃肠外科 广州510150
摘要：目的：构建人ERG基因3′端非翻译区（3′UTR）双荧光素酶报告载体，为研究ERG基因的转录后调控提供实验基础。方法以基因组DNA为模板PCR扩增ERG的3′UTR序列，并连接到psiCHECK2双荧光素酶报告载体的多克隆位点，测序鉴定psiCHECK2－ERG载体构建是否成功。通过生物信息学预测ERG 3′UTR具有miR－145－5p的结合靶点。通过共转染miR－145－5p模拟物和psiCHECK2－ERG载体，检测荧光素酶的活性，以共转染miR－145－5p模拟物对照和psiCHECK2－ERG载体作为参照。结果构建了含有ERG 3′UTR序列的双荧光素酶报告系统，酶切电泳和基因测序证实序列与目标一致。 miR－145－5p模拟物和报告质粒共转染者荧光素酶活性明显下降（28.39％，P＜0.05）。结论含有ERG 3′UTR的双荧光素酶报告载体构建成功。初步鉴定miR－145－5p作用ERG基因3′UTR，对ERG发挥转录后水平调控作用。
关键词：ERG微小RNA双荧光素酶报告载体3′端非编码区
资助基金：广东省科技重大专项(第三批)(2011A080300002)广东省部产学研结合引导项目(2011B090400526)广州市科信局科技支撑计划(2010J－E141)
论文发表日期：2015-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 3097-3100 )
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