一种新型脂肪变性 HepG2细胞模型及线粒体能量代谢障碍评价?
张玉佩1
孔怡琳2
杨钦河1
金玲3
梁荫基1
邓远军1
李媛媛1
程少冰1
1.暨南大学医学院中医系 广州5106322.广东省中医院大学城院区放疗科 广州5100063.暨南大学附属第一医院中医科 广州510632
摘要：目的：探讨建立一种新型的脂肪变性HepG2细胞模型的方法,并对细胞线粒体能量代谢障碍程度进行评价。方法予25%的胎牛血清和0．1%的医用脂肪乳DMEM培养基初步诱导12 h后,进一步予油酸和棕榈酸组成的0．1 mmol/L游离脂肪酸( FFA) DMEM培养基再次诱导12 h,建立脂肪变性HepG2细胞模型,并以无血清DMEM培养基作为对照比较。诱导成功后,采用油红O染色观察细胞内脂滴沉积状况,并用全自动生化仪检测细胞上清液丙氨酸氨基转移酶、天门冬氨酸氨基转移酶含量和细胞内三酰甘油( TG)含量；采用流式细胞仪测定细胞内活性氧( ROS)和线粒体膜电位的变化,采用磷钼酸比色法测定细胞内三磷酸腺苷( ATP)含量,综合评测脂肪变性细胞线粒体能量代谢障碍的程度。结果与对照组比较,模型组细胞内橘红色脂滴大量形成,且TG和ROS含量明显增高(P<0．01),而线粒体膜电位及细胞内ATP含量显著降低(P<0．01)。结论采用25%胎牛血清、0．1%中/长链脂肪乳和0．1 mmol/L FFA分阶段诱导HepG2细胞,可以成功在体外建立脂肪变性细胞模型,该模型会引起细胞线粒体能量代谢紊乱,与非酒精性脂肪性肝病临床发病机制存在相似性。
关键词：HepG2细胞脂肪变性活性氧线粒体膜电位能量代谢
资助基金：国家自然科学基金(81302878,81273617)中国肝炎防治基金会天晴肝病研究基金(CFHPC20132184)广东省中医药局建设中医药强省科研项目(20152112,20151224)
论文发表日期：2016-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 804-807 )