miR-205对人食管鳞癌干细胞转移和分化能力的影响?

吕俊宏; 林少欢; 彭盘俐; 蔡长青; 王文林; 王明智; 邓见明; 李学军

摘要：目的：探讨miR-205对人食管鳞癌干细胞转移、分化能力的影响。方法采用RT-PCR检测20例食管鳞癌细胞、20例正常食管上皮细胞、20例食管非典型增生上皮细胞和20例食管鳞癌干细胞中miR-205、锌指E-盒结合同源异形盒1(ZEB1)、锌指E-盒结合同源异形盒2(ZEB2)以及 E-钙黏蛋白(E-cadherin)的mRNA表达情况。分别利用脂质体Lipofectamine2000将人工合成的miR-205、抗miR-205的抑制剂瞬时转染食管鳞癌干细胞,采用RT-PCR测定食管鳞癌干细胞中miR-205、ZEB1、ZEB2以及 E-cadherin的mRNA转录水平,并采用Western blot方法检测食管鳞癌干细胞中miR-205、ZEB1、ZEB2以及 E-cadherin蛋白的表达。 Tran-swell小室法和划痕实验检测转染的食管鳞癌干细胞的侵袭及迁移能力。结果食管鳞癌细胞和食管鳞癌干细胞中miR-205、ZEB1和ZEB2的mRNA表达相对强度均高于正常食管上皮细胞和食管非典型增生上皮细胞；食管鳞癌细胞和食管鳞癌干细胞中E-cadherin的mRNA表达相对强度则低于正常食管上皮细胞和食管非典型增生上皮细胞(P<0．05)。人工合成的miR-205瞬时转染后,食管鳞癌干细胞中ZEB1和ZEB2的mRNA表达相对强度和蛋白表达水平均较转染前下降,miR-205和E-cadherin的mRNA表达相对强度、蛋白表达水平则均较转染前升高,细胞侵袭及迁移能力降低( P<0．05)。抗miR-205的抑制剂瞬时转染后,食管鳞癌干细胞中ZEB1和ZEB2的mRNA表达相对强度和蛋白表达水平均较转染前升高,miR-205和E-cadherin的mRNA表达相对强度和蛋白表达水平则均较转染前降低,细胞侵袭及迁移能力升高( P<0．05)。结论 miR-205在人食管鳞癌细胞中的表达上调,且可能通过下调ZEB1和ZEB2的mRNA表达相对强度和蛋白表达水平和上调E-cadherin的mRNA表达相对强度和蛋白表达水平起到抑癌基因的作用,上调miR-205表达可能是治疗食管鳞癌的有效方法。