pCMV -Myc -MyD88重组质粒构建及其在293 T细胞中的表达
潘洁1
邓延梅2
何雅军2
刘志河2
吕霞2
沈雁2
宋慧东2
舒建昌2
1.广东省广州市第十二人民医院消化内科 5106202.暨南大学医学院附属广州市红十字会医院消化内科 510220
摘要:目的:构建髓样分化因子88(MyD88)真核表达质粒,并检测其在293T细胞中的表达,为进一步研究应用奠定实验基础。方法从大鼠肝星状细胞株T-6中提取总RNA,应用PCR技术扩增MyD88基因编码序列片段,克隆入真核表达载体pCMV-Myc质粒中,对重组质粒经酶切和测序鉴定后,以钙离子转染法转染至293T细胞中,采用Western blot的方法检测MyD88蛋白的表达,以观察转染及表达效果。结果酶切及测序结果证明pCMV-Myc-MyD88重组质粒的DNA序列正确,将其转染至293T细胞后,MyD88蛋白表达明显增加。结论pCMV-Myc-MyD88重组质粒构建成功,并能在293T细胞中表达,为进一步研究针对MyD88分子的疾病治疗及其生物学功能奠定了实验基础。
关键词:MyD88重组质粒293T细胞
资助基金:王宝恩肝纤维化研究基金(CF-HPC20131014)
论文发表日期:2016-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:3( 1634-1636 )
