miR-195调控NEK2对前列腺癌细胞增殖的影响
赵海波1
吴永定2
梁宇翔2
曾彦茹3
1.广州医科大学附属第五医院泌尿外科 广东广州5107002.广州医科大学附属广州市第一人民医院泌尿外科 广东广州5101803.广州医科大学附属广州市第一人民医院麻醉科 广东广州510180
摘要:目的 研究miR-195调控中心体相关激酶2(NEK2)对前列腺癌细胞增殖的影响.方法 Western blot检测在稳定表达和抑制表达miR-195的LNCaP细胞株中NEK2蛋白的表达水平;构建克隆编码miR-195的序列片段慢病毒载体和表达NEK2的质粒载体,对转染空载体和NEK2,以及同时转染了miR-195模拟物和NEK2、miR-195模拟物和空载体的LNCaP细胞株进行CCK8细胞增殖实验;采用shRNA方法构建干扰NEK2基因表达质粒,NEK2抑制成功和miR-195过表达的LNCaP细胞进行细胞增殖实验,测定si-NC、si-NEK2、si-195的LNCaP细胞的生长速度.结果 在过表达miR-195的LNCaP细胞株中NEK2蛋白的表达水平比阴性对照miR-NC的LNCaP细胞株中蛋白表达水平明显降低(P<0.01);相反,在miR-195被抑制表达的LNCaP细胞株中NEK2蛋白的表达水平明显增加(P<0.01).细胞增殖实验显示转染NEK2基因的LNCaP细胞在72、96 h生长速度显著快于转染空载体的细胞(P<0.01);转染miR-195模拟物和NEK2的LNCaP细胞在72、96 h生长速度显著慢于单纯转染NEK2的LNCaP细胞(P<0.01);si-NEK2的LNCaP细胞在72、96 h生长速度明显慢于si-NC,且与miR-195过表达的LNCaP细胞相似.结论 miR-195负性调控相关下游基因NEK2的表达,抑制前列腺癌细胞的增殖,初步验证了miRNA-195-NEK2信号轴在前列腺癌中的作用.
关键词:miR-195NEK2前列腺癌增殖
资助基金:广东省自然科学基金(2014A030310501)广州市医药卫生科技项目(20141A011006)
论文发表日期:2017-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:4( 1002-1004,1008 )
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