草酸钙晶体引起肾小管上皮细胞紧密连接损伤与TRPV5变化的调节机制
卢穗琳
钟文
李淑珏
赵志健
1.广州医科大学附属第一医院泌尿外科、广东省泌尿外科重点实验室、广州市泌尿外科研究所 广东广州 5102302.广州医科大学附属第一医院泌尿外科、广东省泌尿外科重点实验室、广州市泌尿外科研究所 广东广州 5102303.广州医科大学附属第一医院泌尿外科、广东省泌尿外科重点实验室、广州市泌尿外科研究所 广东广州 5102304.广州医科大学附属第一医院泌尿外科、广东省泌尿外科重点实验室、广州市泌尿外科研究所 广东广州 510230
摘要：目的 探讨草酸钙晶体黏附肾小管上皮引起紧密连接(TJs)损伤与TRPV5变化的调节机制.方法 利用一水草酸钙晶体(COM)暴露犬肾小管上皮细胞(MDCK)及TRPV5稳定过表达HEK-293细胞,2 mmol/L EGTA处理构建细胞TJs损伤模型;采用Western blot、荧光免疫、偏光显微镜等手段,分别检测TJs主要结构蛋白、Na+-K+-ATPase、TRPV5、晶体黏附量等指标,评估草酸钙晶体引起肾小管上皮细胞TJs损伤及TRPV5表达的变化.结果 COM呈下调MDCK细胞TJs蛋白Occludin和ZO-1表达水平(P<0.01).TJs损害后,COM黏附增加(P<0.05);Na+-K+-ATPase介导TJs修复,在1 min时表达最强,随着TJs修复完成而逐步减弱,晶体黏附力也逐渐减弱(P<0.01).COM与TRPV5稳转HEK-293细胞株共培养,下调TRPV5总蛋白及膜蛋白表达水平(P<0.01).结论 草酸钙晶体引起肾小管上皮细胞之间的TJs受损,促进草酸钙晶体黏附;细胞极性破坏,TRPV5膜蛋白转运失调,最终引起TRPV5膜蛋白表达减少.尿钙增加,负反馈激发Na+-K+-ATPase表达使TJs进入修复环节;随着TJs的自我修复,草酸钙晶体黏附减少.
关键词：草酸钙晶体肾小管上皮紧密连接TRPV5
资助基金：广东省优秀青年教师培养计划项目(B158027)广州市科技计划项目(201610010169)广州市市属高校科研项目(1201620038)
论文发表日期：2017-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 2109-2113 )
英文信息