M2型巨噬细胞对草酸钙晶体刺激肾小管上皮细胞损伤的影响
刘权
关晓峰
陶芝伟
王翔
吴基华
刘云龙
何子奇
邓耀良
摘要：目的 探讨M2型巨噬细胞对草酸钙晶体(CaOx)刺激肾小管上皮细胞(HK-2)损伤的影响.方法 将人单核细胞(THP-1)经佛波酯(PMA)及白细胞介素(IL)-4、IL-13序贯诱导为M2型巨噬细胞,使用实时定量PCR、Western Blot、ELISA法检测其表型标志物,以鉴定诱导分化情况.用浓度为0.5 mg/mL的CaOx刺激HK-2细胞,利用Transwell建立M2型巨噬细胞(上室)与HK-2细胞(下室)共培养模型,实验分组为HK-2细胞组、HK-2细胞+M2型巨噬细胞共培养组、HK-2细胞+CaOx组、HK-2细胞+CaOx +M2型巨噬细胞共培养组.使用CCK-8法检测各组HK-2细胞活力、微量酶标仪法测各组HK-2细胞上清液的乳酸脱氢酶(LDH)活性、DAPI进行凋亡染色和Western Blot检测各组HK-2细胞抗凋亡蛋白Bcl-2的表达情况.划痕实验观测M2型巨噬细胞对HK-2细胞的迁移、修复的影响.结果 表型标志物鉴定结果显示,成功将THP-1细胞序贯诱导为M2型巨噬细胞.CCK-8法结果显示M2型巨噬细胞显著增加CaOx对HK-2细胞损伤后的活力,且M2型巨噬细胞对HK-2细胞增殖具有促进作用(P＜0.05).LDH活性检测结果显示M2型巨噬细胞显著性降低CaOx刺激HK-2细胞的LDH活性(P＜0.05).DAPI染色及抗凋亡蛋白Bcl-2的表达结果显示M2型巨噬细胞具有抑制CaOx刺激HK-2细胞凋亡的作用.划痕实验显示M2型巨噬细胞对HK-2细胞具有促进迁移、修复的作用.结论 M2型巨噬细胞对CaOx刺激HK-2细胞的损伤具有一定的抑制作用,且可促进HK-2细胞增殖、迁移.
关键词：M2 型巨噬细胞草酸钙晶体肾小管上皮细胞损伤
论文发表日期：2018-01-01
页数：5( 331-335 )
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