C-sis基因对过氧化氢诱导大鼠肝细胞凋亡的抑制作用
张弘英1
胡树根2
元文峰3
丁浩1
1.南昌大学第二附属医院消化内科,江西 南昌,3300062.南昌新建区人民医院,江西 南昌,3301003.乐安县人民医院内二科,江西 抚州,344300
摘要：目的 探讨大鼠C-sis基因对过氧化氢(H2O2)诱导肝细胞凋亡的影响.方法 使用脂质体转染法把重组质粒pcDNA3. 1/C-sis和空载质粒pcDNA3. 1转染进入正常大鼠肝细胞株BRL细胞,转染后的6～8 h用浓度为200 μmol/L的H2O2处理细胞,作用48 h后收获细胞.细胞分为正常对照组、空载质粒组、C-sis质粒组、H2O2组、空载质粒+H2O2组、C-sis质粒+H2O2组.利用荧光定量PCR检测C-sis的mRNA表达;利用Western blot检测C-sis的蛋白表达和Caspase3活性;利用CCK8检测细胞活力;利用TUNEL检测细胞凋亡;利用流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期.结果 与正常对照组和空载质粒组相比, C-sis质粒组的C-sis mRNA和蛋白表达水平显著升高(P均< 0.01).与正常对照组相比,H2O2组的细胞活力明显下降(P＜0.01),激活型Caspase3蛋白明显升高(P＜0.01);与空载质粒+H2O2组相比,C-sis质粒+H2O2组的细胞活力升高(P＜0.01),激活型Caspase3蛋白降低(P＜0.05).TUNEL结果显示,与正常对照组相比,H2O2组的细胞凋亡明显升高(P＜0.01);与空载质粒+H2O2组相比,C-sis质粒+H2O2组的细胞凋亡明显降低(P＜0.01).流式细胞术结果显示,与正常对照组相比,H2O2组的细胞凋亡率明显升高(P＜0.01);与空载质粒+H2O2组相比,C-sis质粒+H2O2组的细胞凋亡明显降低(P＜0.01).各组之间的细胞周期没有明显区别(P＞0.05).结论 C-sis基因能抑制H2O2诱导的肝细胞凋亡,并促进其生长.
关键词：C-sis过氧化氢BRL 细胞凋亡
资助基金：国家自然科学基金(81300348)江西省青年科学基金(20151BAB215006)江西省教育厅科学技术研究项目(GJJ150259)江西省卫生计生委科技项目(20165199)
论文发表日期：2018-01-30
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 346-349 )