PCOS患者颗粒细胞CYP19A1、AMH、AMHR2的启动子区CpG岛位点的甲基化水平
朱金虎
杨秀玮
洪小山
毛婷
万迎香
摘要：目的 研究卵巢颗粒细胞特异性表达基因CYP19A1、抗苗勒管激素(AMH)、AMHR2 的启动子区CpG岛位点甲基化水平,并分析甲基化与基因的表达是否具有相关性.方法 收集体外受精-胚胎移植(IVF-ET)过程中剩余的颗粒细胞60例,其中包括维族多囊卵巢综合征( PCOS)患者的颗粒细胞30例和正常的维族女性颗粒细胞30例.采集研究对象的临床资料,行 IVF 前于卵泡期抽取静脉血测定基础激素指标[卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)、雌二醇(E2)、睾酮(T)、催乳素(PRL)].于采卵后收集患者的卵泡液,ELISA法检测卵泡液中E2、雄烯二酮(A)、AMH 水平.采用MSP技术对芯片筛选出来的甲基化差异基因CYP19A1、AMH、AMHR2的甲基化位点进行检测.同时采用 Real-time PCR和Western blot 技术检测这些基因的mRNA及蛋白质表达水平,采用 Pearson correlation 法计算这些基因的甲基化与表达的相关性.结果维族PCOS 患者基础水平的 LH、T、LH/FSH明显高于正常维族女性,E2/T明显低于正常维族女性.维族P-COS 患者的卵泡液中A、AMH明显高于正常维族女性,E2/T明显低于正常维族女性.维族PCOS患者颗粒细胞中CYP19A1 基因的甲基化水平高于正常维族女性,AMH 和 AMHR2 基因的甲基化水平低于正常维族女性,差异有统计学意义(P＜0.05).维族PCOS患者颗粒细胞中 CYP19A1 基因的表达水平低于正常维族女性,AMH和AMHR2基因的表达水平高于正常维族女性,这些基因的表达水平与其启动子的甲基化水平呈负相关(P＜0.05). CYP19A1 与AMH和AMHR2 的mRNA表达呈负相关(P＜0.05).结论 维族PCOS患者颗粒细胞存在 CYP19A1、AMH 和 AMHR2 基因的甲基化改变,且这种改变与其对应分子的表达变化相关.CYP19A1甲基化水平与卵泡液E2/A比值相关,提示 CYP19A1基因的甲基化抑制了芳香化酶的活性,使卵巢局部雄激素合成增多.
关键词：甲基化颗粒细胞多囊卵巢综合征
论文发表日期：2018-01-01
页数：6( 1171-1176 )
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