α-烯醇酶对胃癌细胞株MGC-803上皮间质转化的影响
林博德1
吴莉莉2
何荣威1
陈婷婷1
杜进林1
潘海燕1
黄志刚1
1.广东医科大学公共卫生学院流行病与卫生统计学教研室 广东东莞 5238082.东莞市大朗医院检验科 广东东莞 523770
摘要:目的 研究α-烯醇酶(α-enolase, ENO1)对MGC-803胃癌细胞上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition, EMT)的作用.方法 扩增 ENO1 基因编码区序列,构建真核表达载体 pcDNA3.1/ENO1并测序;脂质体转染胃癌细胞,以pcDNA3.1/ENO1 质粒转染细胞为ENO1 组,以空质粒pcDNA3.1 转染细胞为对照组,Real-time PCR和Western Blot分别检测各组ENO1的mRNA及蛋白表达情况;在转染24 h收集两组细胞,Real-time PCR检测并比较EMT特异标志基因E-cadherin、Snail及Vimentin表达水平;合成特异干扰ENO1的siRNA片段,脂质体转染癌细胞,在转染24 h收集干扰组和对照组细胞,Real-time PCR检测EMT特异基因表达水平.结果 Real-time PCR结果显示,ENO1组ENO1 mRNA相对表达量高于对照组(P<0.05);Western Blot发现,ENO1组ENO1蛋白相对表达量也高于对照组(P<0.05).结果发现转染24 h后ENO1组E-cadherin、Snail及Vimentin等基因的表达水平与对照组相比差异无统计学意义( P>0.05);转染24 h后干扰组E-cadherin、Snail 及 Vimentin 等基因的表达水平与对照组相比差异无统计学意义( P >0.05).结论 在胃癌细胞内过表达及干扰ENO1表达,对细胞EMT并无明显作用,ENO1对胃癌细胞功能的影响可能与EMT无关.
关键词:胃癌细胞ENO1基因上皮间质转化
资助基金:广东省科技发展专项资金项目(2016A030313683)东莞市社会科技发展项目(2013108101052)东莞市社会科技发展项目(2014108101051)东莞市社会科技发展项目(2016108101039)
论文发表日期:2018-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:6( 1460-1465 )
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广东医学

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ISSN:1001-9448
年,卷(期):2018,39(10)
所属栏目:基础研究