microRNA-24对自噬的调节及血管内皮细胞管腔形成的影响
杨鹏
欧和生
莫国君
罗雪兰
沈凤
陶晓静
吕冬宁
1.广西医科大学药学院 广西南宁5300212.广西医科大学药学院 广西南宁5300213.广西医科大学药学院 广西南宁5300214.广西医科大学药学院 广西南宁5300215.广西医科大学药学院 广西南宁5300216.广西医科大学药学院 广西南宁5300217.广西医科大学药学院 广西南宁530021
摘要：目的 探讨microRNA-24(miR-24)对自噬相关基因LC3Ⅱ和Beclin-1的调节及其对血管内皮细胞管腔形成能力的影响.方法 将人脐静脉内皮细胞(HUVECs)随机分为空白对照组、雷帕霉素+miR-24高表达组以及雷帕霉素组.其中空白对照组的细胞不作任何处理;雷帕霉素+miR-24高表达组的细胞先转染miR-24高表达质粒,再用1000 nmol/L的雷帕霉素干预6 h建立自噬模型;雷帕霉素组的细胞同样用1000 nmol/L的雷帕霉素干预6 h建立自噬模型;然后分别用MTT法检测HUVECs的增殖能力、细胞划痕实验检测HUVECs迁移能力及Matrigel实验检测HUVECs管腔形成能力,进一步用蛋白免疫印迹法(Western blot)和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)分别检测LC3II和Beclin-1的蛋白和mRNA表达水平.结果 (1)与空白对照组相比,雷帕霉素组、雷帕霉素+miR-24高表达组细胞增殖能力和迁移比例降低(P<0.05),雷帕霉素组的管腔形成数量、长度与空白对照组相近,而雷帕霉素+miR-24高表达组则基本没有形成明显管腔样结构.(2)与空白对照组相比,雷帕霉素+miR-24高表达组和雷帕霉素组的LC3II和Be-clin-1 mRNA和蛋白表达量均不同程度增加(P<0.05).(3)在雷帕霉素+miR-24高表达组中,上述指标较雷帕霉素组均降低(P<0.05),特别是管腔形成数目明显减少.结论 miR-24可在转录后水平调控自噬相关基因LC3II和Beclin-1的表达,进而下调细胞自噬水平.这很有可能是miR-24抑制HUVECs增殖、迁移和管腔形成的机制之一.
关键词：miR-24管腔自噬LC3IIBeclin-1
资助基金：国家自然科学基金(81373403)
论文发表日期：2018-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 2268-2273 )
英文信息