NLRP3在巨噬细胞抗铜绿假单胞菌感染中的作用
邓秋婵
匡文斌
张肄鹏
张勇刚
1.深圳市龙华区中心医院检验科 广东深圳 5181102.深圳市龙华区中心医院检验科 广东深圳 5181103.深圳市龙华区中心医院检验科 广东深圳 5181104.深圳市龙华区中心医院检验科 广东深圳 518110
摘要：目的 阐明抗铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa,PA)感染人巨噬细胞后炎症小体激活的情况,并通过沉默炎症小体探讨其在PA感染过程中的作用与机制.方法 分别用酶联免疫吸附剂测定(ELISA)、Real-time PCR和蛋白质免疫印迹(Western blot)实验检测PA感染后白细胞介素-1β(IL-1β)、胱冬肽酶-1(caspase-1)、核苷酸结合寡聚化结构域样受体(NLR)家族成员含热蛋白结构域蛋白3(NLRP3)的表达情况;siRNA沉默NLRP3炎症小体后ELISA检测IL-1β和caspase-1的分泌,免疫荧光染色和激光共聚焦显微成像直观观察NLRP3炎症小体确定其激活情况,并用细菌平板计数法检测巨噬细胞对PA的杀伤;继而通过Real-time PCR、Griess reaction、流式细胞术、Western blot和免疫荧光实验从抗菌肽、一氧化氮(NO)、活性氧簇(ROS)和自噬4个方面探讨炎症小体影响PA杀伤的机制.结果 PA感染人巨噬细胞能够激活NLRP3炎症小体.沉默NLRP3炎症小体可促进巨噬细胞对PA的杀伤和自噬的发生,而对抗菌肽、NO和ROS无影响.结论 PA激活的NLRP3炎症小体通过促进自噬从而抑制巨噬细胞对PA的杀伤.
关键词：铜绿假单胞菌角膜炎NLRP3炎症小体
分类号：Q939.92(应用微生物学)R392.12(医学免疫学)
资助基金：国家自然科学基金(81601382)广东省医学科研基金(A2016543)深圳市科技研发项目(JCYJ20160428)深圳市科技研发项目(141830465)深圳市龙华新区项目(20160523A1030137)
论文发表日期：2019-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：8( 321-328 )
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