荧光探针熔解曲线分析法快速检测SMN1基因纯合性缺失
孙曼娜
娄季武
赵颖
付有晴
刘彦慧
李亮
摘要：目的 建立一种快速检测SMN1基因纯合缺失的荧光探针熔解曲线分析方法.方法 收集正常成人的外周血标本94份,经MLPA检测过的已知SMN1和SMN2基因拷贝数的样本238例.采用荧光探针熔解曲线分析技术,分别对SMN1基因c.840C＞T和c.835-45G＞A进行基因分型,根据基因分型结果判断是否存在SMN1基因exon7纯合缺失.对SMN1基因和SMN2基因拷贝数比值为2∶2、2∶0和0∶2基因型样本进行10倍梯度稀释,评估检测体系的敏感性.选取SMN1基因和SMN2基因拷贝数比值为2∶2、2∶0和0∶2基因型样本各8例,不同时间检测3次,用于评估检测体系的重复性.结果 该方法可以方便地检测SMN1基因exon7纯合缺失,灵敏度至少为0.05 ng基因组DNA.应用此方法检测94例正常成人样本,未发现SMN1基因exon7纯合缺失;对238例已知基因型样本进行检测,结果显示准确率为100％.结论 荧光探针熔解曲线分析方法可以快速准确检测SMN1基因exon7纯合缺失,操作简单实用,适合大规模人群筛查和产前分子诊断.
关键词：脊髓性肌肉萎缩症基因缺失生存运动神经元基因熔解曲线分析
分类号：R394.3(医学遗传学)R596.2(全身性疾病)
论文发表日期：2019-01-01
页数：5( 1546-1550 )
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