改进后的验证SREBP-1c下游调控基因的染色质免疫共沉淀方法
李建宁1
李旺2
杨玲玲1
李雨涵2
祁慧2
宋辉2
李岩1
杨怡1
1.宁夏医科大学 基础医学院生物化学与分子生物学系,宁夏银川7500042.宁夏医科大学 内分泌研究所,宁夏银川750004
摘要：目的 以SREBP-1c下游调控基因为例,对HEK 293T细胞进行染色质免疫共沉淀(chromatin co-immunoprecipitation,CHIP)实验改进,获得更好实验结果.方法 对常规CHIP改进方法包括细胞洗涤时添加蛋白酶抑制剂PMSF、免疫沉淀复合物采用3步洗涤法、解交联采用蛋白酶K 56℃水浴10 min、样品DNA采用基因组提取试剂盒回收.结果 与常规CHIP相比,改进后的CHIP获得纯度更高的样品DNA.结论 改进后方法更适用于细胞染色质免疫共沉淀,使细胞中基因表达调控研究中DNA提取与鉴定更高效.
关键词：染色质共沉淀DNA蛋白质PCR
分类号：Q-33(生物学实验与生物学技术)Q243(细胞形态学)
资助基金：宁夏医科大学科学研究基金资助项目(XY2017001)宁夏卫生厅重点科研项目(2018-NW-002)
论文发表日期：2019-09-10
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 2439-2443 )
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