大鼠骨髓间充质干细胞分离方法的改良与比较
马逸群1
邵丽诗1
万珊杉2
杨扬1
李嘉琦1
王家平1
1.昆明医科大学第二附属医院影像科 云南昆明6505002.云南昆钢医院放射科 云南昆明650500
摘要：目的 探索改进大鼠原代骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs)的分离培养方法,以获取生长状态良好、数量多、传代所需时间短的BMSCs.方法 选取6周龄的SD大鼠,从长骨中提取BMSCs,采用细胞刮刮取法(A组)、胰蛋白酶消化法(B组)及胰蛋白酶消化合并细胞刮刮取法(C组)分离BMSCs,比较原代培养瓶剩余细胞数量、P1代每高倍视野细胞数目、传代后到收获所需的时间.结果 A组与C组贴壁细胞数目较少,镜下多数区域几乎未见BMSCs,分离较为彻底;B组瓶底可见较多贴壁细胞,呈圆形,形态相似,大小均一传代后.第1天时C组BMSCs贴壁数目明显多于其余两组(P<0.001),同时各组培养基中可见少量悬浮细胞.第2天起C组贴壁细胞开始呈现鱼群状分布趋势,其余两组仍呈散在分布.第7天时,C组细胞几乎长满瓶底,BMSCs生长融合达80％ ～90％,其余两组细胞间隙较大,仍未达到收获标准.C组在传代后第5天便有1瓶BMSCs长满瓶底,其余各瓶第7天时也几乎达到收获标准.A组从传代到收获所用时间为(8.1±0.8)d,B组所用时间为(10.3±0.8)d,C组所用时间为(6.7±0.9)d.C组收获时间明显短于其余两组(P<0.001).结论 胰蛋白酶消化合并细胞刮刮取法是一种快速、实用、高效的骨髓间充质干细胞分离培养技术.
关键词：骨髓间充质干细胞细胞刮胰酶传代细胞培养
分类号：R-331(实验医学、医学实验)R-332(实验医学、医学实验)
资助基金：国家自然科学基金(81860144)云南省教育厅科研项目(2019Y0360)昆明市十百千工程学科带头人后备人才资助项目(2018-SW;112)
论文发表日期：2020-07-25
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 1417-1420 )
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