DOT1L对骨肉瘤MG63细胞生物学行为的影响及其作用机制
王洪伸1
林涌鹏2
尹萌辰3
常君丽4
陈博来2
1.广州中医药大学第二附属医院骨伤一科 广东广州 510120;上海中医药大学博士后流动站、广东省中医院博士后工作站2.广州中医药大学第二附属医院骨伤一科 广东广州 5101203.上海中医药大学附属龙华医院 骨伤科 上海2000324.上海中医药大学附属龙华医院 上海中医药大学脊柱病研究所 上海200032
摘要：目的 探讨抑制组蛋白H3赖氨酸79(H3K79)甲基转移酶DOT1L基因对骨肉瘤MG63细胞增殖、迁移、DNA损伤的影响及可能的作用机制.方法 将hDOT1L-shRNA质粒转染至骨肉瘤MG63细胞(hDOT1L-shRNA组),同时设置shRNA阴性对照组(Scramble组).采用实时荧光定量PCR检测DOT1L mRNA的表达水平,MTT法检测细胞增殖能力,划痕实验检测细胞迁移能力,TUNEL法和彗星实验检测细胞DNA损伤.Western blot检测MG63细胞中DOT1L、H3K79me2、Histone H3、Sirt1、XPA蛋白的表达水平.结果 转染后,与Scramble组相比,hDOT1L-shRNA组MG63细胞中DOT1L mRNA及蛋白表达水平下调(P<0.05),细胞增殖能力降低(P<0.05),细胞迁移率降低(P<0.05),DNA损伤程度加剧(P<0.05).Western blot检测结果显示,与Scramble组相比,hDOT1L-shRNA组MG63细胞中细胞Histone H3总量差异无统计学意义(P>0.05),其他DOT1L、H3K79me2、Sirt1、XPA蛋白表达水平均降低.结论 DOT1L可能通过DOT1L/H3K79me2-SIRT1-XPA信号通路抑制骨肉瘤MG63细胞增殖、迁移并诱导其DNA损伤.
关键词：骨肉瘤DOT1 LSIRT1增殖迁移DNA损伤
分类号：R73-37(肿瘤学实验研究)R738.1(运动系肿瘤)
资助基金：国家自然科学基金(81704097)广东省普通高等学校特色创新类项目(2019KTSCX024)广州市科技计划(202102010012)
论文发表日期：2021-08-28
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 904-908 )
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