简并引物q-PCR法检测新疆喀什地区羊肝组织中细粒棘球绦虫
王会品1
李欣2
孙世珺1
1.中山市人民医院分子诊断中心,广东中山5284002.中山市人民医院耳鼻咽喉科,广东中山528400
摘要:目的 建立检测新疆喀什地区羊肝组织中细粒棘球绦虫的分子生物学方法,提高包虫病的早期诊断水平.方法 对羊肝组织内获取棘球蚴囊,将囊内容物离心沉淀提取DNA,以细粒棘球绦虫线粒体cytochrome b基因为靶基因设计引物进行PCR扩增,引物设计考虑简并碱基.结果 建立的简并引物q-PCR法特异性好,与常见的宿主动物(羊、驴和犬)基因组无交叉扩增现象,与肝内的常见寄生虫(肝片吸虫和莫尼茨绦虫)基因组无交叉扩增.梯度稀释的基因组DNA:10 ng、1 ng、100pg、10pg进行qPCR实验均能得到标准的S型曲线.PCR体系R2=0.984,效率:92.6%,符合qPCR的相关要求.结论 线粒体基因组的cyto-chrome b基因分析是棘球蚴病诊断和分型的有力工具.喀什地区首次应用简并引物q-PCR法检测细粒棘球绦虫,灵敏度高,特异性好,为下一步对该地区进行包虫病分子流行病调查提供了技术支撑.
关键词:细粒棘球蚴cytochrome b基因基因型分子流行病学
分类号:R34(基础医学)R381(医学寄生虫学)
资助基金:中山市社会公益科技研究项目(2018B1083)
论文发表日期:2022-01-28
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:5( 46-50 )
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