高糖刺激的巨噬细胞源外泌体通过激活NF-κB/TGF-β1信号通路促进肾小球纤维化
宋惠杰
李阳
谭燚
何旭梅
武汉市第一医院内分泌科(湖北武汉 430022)
摘要：目的 探讨高糖(HG)处理的巨噬细胞源性外泌体(Exos)是否能激活肾小球系膜细胞和产生促纤维化细胞因子,并探讨其作用机制是否与激活核因子-κB(NF-κB)/转化生长因子-β1(TGF-β1)信号通路有关.方法 将高糖处理Raw264.7细胞的外泌体(HG-Exos)和SV40MES13细胞体外孵育24 h.通过EdU和TUNEL实验评估Exos对SV40MES13细胞增殖、凋亡的影响,ELISA法测定上清液中细胞外基质(ECM)的主要成分[Ⅳ型胶原(Col Ⅳ)和纤维连接蛋白(FN)].采用定量RT-PCR分析细胞分泌的TGF-β1 mRNA表达,采用Western blot法检测细胞中NF-κB/TGF-β1/Smad3信号通路蛋白表达.结果 与NG-Exos相比,HG-Exos处理的SV40MES13细胞分泌Col Ⅳ、FN蛋白和TGF-β1 mRNA显著增加(P＜0.05).Western blot 分析证实,经 HG-Exos 处理的 SV40MES13 细胞内 TGF-β1、Smad3、p-Smad3、NF-κB p65 和p-NF-κB p65蛋白表达较NG-Exos处理显著升高(P＜0.05).当用PDTC(NF-κB特异性抑制剂)与HG-Exos联合处理SV40MES13细胞24 h后,细胞内Col Ⅳ、FN、TGF-β1、Smad3和p-Smad3蛋白表达较单用HG-Exos明显降低.结论 高糖处理的巨噬细胞源性Exos可能通过NF-κB/TGF-β1信号通路激活肾小球系膜细胞,加速肾纤维化.
关键词：高糖巨噬细胞外泌体肾脏纤维化NF-κB/TGF-β1信号
分类号：R58(内分泌腺疾病及代谢病)R34(基础医学)
资助基金：湖北省卫生健康委员会科研项目(20210845)
论文发表日期：2024-11-28
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 1391-1396 )
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