小胶质细胞不同极化状态下P2rx7剪接变异体差异化表达
安晓萌1
周方宇1
张霁2
许学兵3
1.香港大学深圳医院中心实验室,(广东 深圳 518053)2.香港大学深圳医院临床-转化-基础科研实验室,(广东 深圳 518053)3.香港大学深圳医院麻醉医学部(广东 深圳 518053)
摘要：目的 P2X7受体(P2rx7)的选择性剪切影响P2rx7基因外显子的表达,是调节P2rx7功能的主要方式之一.本研究分析小胶质细胞M1/M2极化状态下P2rx7不同剪接异构体的差异表达.方法 培养并增殖BV2永生化小鼠小胶质细胞,利用药物脂多糖(LPS,100 ng/mL)或白细胞介素-4(IL-4,40 ng/mL)分别刺激BV2细胞,培养48 h后通过流式细胞仪分析确定细胞M1/M2极化状态,并采用实时定量PCR分析小鼠P2rx7-v1、-v2、-v3、-v4和-vk等5种P2rx7剪接异构体的表达量.结果 正常培养条件下小鼠小胶质细胞系BV2中所有P2rx7 各转录本均可在mRNA水平检测到,其中P2rx7-v1是BV2细胞系中表达的主要形式,P2rx7-v2、-v3、-v4和-vk等异构体表达量相对较少或几乎没有.应用LPS刺激培养BV2细胞48 h后,显著抑制了 M2相关标志物CD206的表达(P＜0.01),M1相关标志物CD86的表达略有升高但差异无统计学意义(13.0％vs.78.8％,P=0.054),此时P2rx7-v1、-v2、-v3、-v4和-vk等异构体表达量均有明显增加(P＜0.01),P2rx7-v4表达量增加相对较小(15.8％,P＜0.05).IL-4刺激培养BV2细胞48 h后,M2相关标志物CD206表达显著增加(280.2％,P＜0.01),而M1相关标志物CD86表达明显减少(47.6％,P=0.035),进一步检测显示P2rx7-v1、-v4异构体表达量明显减少(64.9％vs.52.9％,P＜0.01),P2rx7-v3的表达量则略有增加(61.7％,P＜0.01).结论 小胶质细胞M1/M2极化状态下5种P2rx7剪接异构体呈现不同程度表达改变,进一步研究不同P2rx7剪接异构体的结构功能是否影响小胶质细胞极化状态很有必要.
关键词：小胶质细胞极化P2X7受体剪接变异体
分类号：R614(外科手术学)R765(鼻科学、鼻疾病)
资助基金：深圳市科技计划项目(JCYJ20210324114607020)
论文发表日期：2024-11-28
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 1413-1417 )
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