人干细胞因子（SCF）5’旁侧调控序列与其全长cDNA融合克隆的构建及鉴定
谭运年1
谭文斌2
彭兴华2
1.广东医学院附属医院妇产科研究室，2.湖南医科大学分子生物学研究中心,
摘要：目的：为研究人干细胞因子（SCF）5’旁侧1.42 kb区域内不同序列对全长cDNA在真核细胞中表达的调控作用，构建了SCF5’旁侧1．42 kb的调控序列与其1．2 kb的全长cDNA融合克隆。方法：将PCR获得的SCF5’旁侧1．42 kb的调控序列与RT-PCR获得的其1．2 kb的全长cDNA克隆入pGEM-T载体，筛选正确插入方向，利用合适的限制性内切酶从中切出三个片段依次亚克隆入pUC19克隆载体中。结果：获得了SCF5’旁侧 1．42 kb的调控序列与其1．2 kb的全长cDNA并成功地构建了它们的融合克隆。结论：T-载体在克隆添加了少量具有3’→5’外切核酸酶的PCR产物中仍然有效；在稍大片段的基因克隆操作中，利用分段亚克隆的方法，避开干扰另外的酶切位点，依次分段亚克隆更为可行。
关键词：人干细胞因子调控序列cDNA融合克隆
分类号：Q78(基因工程（遗传工程）)Q523(核酸)
资助基金：国家自然科学基金(39700050)
论文发表日期：2001-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 6-9 )
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