脱氧核酶对端粒酶hTERT mRNA的切割以及对鼻咽癌细胞凋亡相关基因的影响
赵家明1
李明意2
李震1
杨展1
张毅1
1.广东医学院附属医院,中心实验室,广东,湛江,5240012.广东医学院附属医院,肝胆外科,广东,湛江,524001
摘要：目的:探讨脱氧核酶对端粒酶蛋白亚基hTERT mRNA的切割作用及对人鼻咽癌细胞凋亡相关基因表达的影响.方法:针对hTERT基因的核苷酸序列,合成"10～23"型脱氧核酶及其类似物,提取总RNA在体外切割hTERTmRNA;转染鼻咽癌细胞后,用RT-PCR扩增hTERT基因片段,用PCR-ELISA法测定端粒酶活性,用RT-PCR和荧光免疫测定凋亡相关基因bcl-2和bax的表达.结果:未经修饰的脱氧核酶DzT和在DzT的3'末段添加例位连接T碱基的脱氧核酶DzTi在体外能够有效地切割hTERT mRNA;在转染鼻咽癌细胞后,DzTi比DzT对hTERT mRNA表现出更强的切割作用,DzTi能够显著地降低鼻咽癌细胞端粒酶活性(P＜0.01)、抑制鼻咽癌细胞的生长(P＜0.05)和bcl-2基因的表达(P＜0.05).上调bax基因的表达(P＜0.05).DzT和DzTi的催化中心的一个碱基被替换后形成的脱氧寡核苷酸DzT'和DzTi'在体外和胞内均不表现对hTERT mRNA的切割作用.结论:人工合成的脱氧核酶确实能够高效特异地切割端粒酶hTERT mRNA,并降低鼻咽癌细胞的端粒酶活性,促进鼻咽癌细胞凋亡.作为一种新发现的催化性核酸,脱氧核酶在肿瘤的基因治疗领域中将具有极其重要的应用价值.
关键词：脱氧核酶端粒酶鼻咽肿瘤细胞凋亡
分类号：R739.6(耳鼻咽喉肿瘤)Q523(核酸)
论文发表日期：2005-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 242-245 )
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