人pot1基因cDNA的克隆及其在HeLa细胞中的表达
姜英华
黄迪南
祝其锋
1.广东医学院生物化学与分子生物学研究所,广东湛江,5240232.广东医学院生物化学与分子生物学研究所,广东湛江,5240233.广东医学院生物化学与分子生物学研究所,广东湛江,524023
摘要：目的:克隆人端粒保护蛋白 (human protection of telomeres 1,pot1)基因cDNA全编码区,构建成真核表达质粒并实现在HeLa细胞中的表达.方法:RT-PCR法扩增出HeLa细胞hpot1基因cDNA编码区全序列,定向克隆至真核表达载体pcDNA3,阳性重组质粒经插入片段测序验证;重组的pcDNA3-hpot1质粒瞬时转染HeLa细胞,RT-PCR和EMSA法(电泳迁移率改变分析)检测hpot1基因的表达水平.结果:来自Hela细胞的hpot1基因cDNA编码区全序列构建成的真核表达质粒pcDNA3-hpot1,经测序分析序列和ORF正确;该重组质粒转染在HeLa细胞48h后,hpot1基因表达水平增高.结论:真核表达载体pcDNA3-hpot1构建成功,并实现了hpot1在Hela细胞中的表达.
关键词：hpot1基因克隆真核表达
分类号：R34(基础医学)
资助基金：广东省博士启动基金(04011397)
论文发表日期：2005-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：3( 639-641 )
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