靶基因Bi-1RNAi重组慢病毒载体的构建与鉴定
李祥勇
张美红
林观平
周克元
1.广东医学院生物化学与分子生物学研究所,广东湛江,5240232.广东医学院生物化学与分子生物学研究所,广东湛江,5240233.广东医学院生物化学与分子生物学研究所,广东湛江,5240234.广东医学院生物化学与分子生物学研究所,广东湛江,524023
摘要：目的 构建靶向人Bax Inhibitor-1(Bi-1)基因的shRNA慢病毒重组载体.方法 借助siRNA设计工具,并结合文献资料选取Bi-1基因编码序列中有效的干扰靶点,根据连接载体中的酶切位点自行设计并人工合成干扰靶点的一对反义脱氧寡核苷酸链,先定向克隆到pU6载体(pU6-Bi-1-shRNA),再经双酶切后克隆到慢病毒包装质粒LunIG,得到靶向Bi-1基因沉默的慢病毒包装重组质粒LunIG-Bi-1.重组质粒经PCR法进行初筛后,再通过双酶切电泳和目的 基因沉默效果的检测保证插入序列的正确性.结果 靶向沉默Bi-1基因的shRNA序列成功插入到慢病毒包装质粒LunIG中.结论 靶向Bi-1基因沉默的慢病毒shRNA包装重组质粒构建成功.
关键词：Bi-1基因沉默RNAi慢病毒载体
分类号：R739.63(耳鼻咽喉肿瘤)
资助基金：广东省科技计划(83039)湛江市科技攻关计划(2009C3101012)
论文发表日期：2010-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 489-492 )
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