慢病毒载体介导的APP695过表达SH-SY5Y细胞系的构建和鉴定
崔理立
蔡玉洁
刘根
程婉雯
刘宇
刘婷婷
李友
1.广东医学院、广东省衰老相关心脑疾病重点实验室,广东湛江,5240012.广东医学院、广东省衰老相关心脑疾病重点实验室,广东湛江,5240013.广东医学院、广东省衰老相关心脑疾病重点实验室,广东湛江,5240014.广东医学院、广东省衰老相关心脑疾病重点实验室,广东湛江,5240015.广东医学院、广东省衰老相关心脑疾病重点实验室,广东湛江,5240016.广东医学院、广东省衰老相关心脑疾病重点实验室,广东湛江,5240017.广东医学院、广东省衰老相关心脑疾病重点实验室,广东湛江,524001
摘要：目的 通过构建pLVX-APP695-PGK-Puro慢病毒载体,用以建立可以稳定过表达APP695蛋白的SH-SY5Y-APP695细胞株.方法 利用PCR方法扩增目的基因片段APP695,并构建pLVX-APP695-PGK-Puro慢病毒载体,鉴定后将构建好的载体与慢病毒包装系统共转染293会细胞,并以最适感染复数感染神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞,筛选稳转SH-SY5Y-APP695细胞株并用PCR和Westerm blot鉴定稳转株细胞APP695表达.结果 对pLVX-APP695-PGK-Puro载体进行酶切鉴定及DNA测序证明构建过表达APP695的重组慢病毒载体成功,PCR和Western blot显示构建的SH-SY5Y细胞稳转株成功.结论 成功构建APP695基因的慢病毒载体并成功构建了SH-SY5Y-APP695细胞株,该载体可在SH-SY5Y细胞株中高水平表达APP695.
关键词：淀粉样前体蛋白695慢病毒载体SH-SY5Y细胞
分类号：R965.2(药理学)
资助基金：国家自然科学基金项目(81271214)广东省科技厅博士启动项目(S2013040013740)广东医学院心脑相关广东省重点实验室开放基金项目(GDKLARCCD201301)广东医学院科研基金博士启动项目(S2013040013740)广东中医药局2013建设中医药强省科研课题项目(20131257)广东省医学科研基金项目(B2013306)
论文发表日期：2014-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 435-438 )
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