靶向IGFBP7慢病毒载体遏制恶性黑素瘤的实验研究
陈嵘祎
阿彩岭
李南
潘紫凤
蔡川川
罗世英
1.广东医学院附属医院皮肤科,广东湛江,5240012.广东医学院附属医院皮肤科,广东湛江,5240013.广东医学院附属医院皮肤科,广东湛江,5240014.广东医学院附属医院皮肤科,广东湛江,5240015.广东医学院附属医院皮肤科,广东湛江,5240016.广东医学院附属医院皮肤科,广东湛江,524001
摘要：目的 构建靶向IGFBP7的LV5病毒表达载体,并检测其表达效能及在黑素瘤细胞系中促凋亡的作用.方法 以人igfbp7基因序列作为模版合成编码核酸序列,通过限制性内切酶Not Ⅰ和Nsi Ⅰ酶切、T4 DNA连接酶连接,将igfbp7插入LV5-GFP,构建靶向IGFBP7的慢病毒质粒表达载体,筛选阳性克隆后与包装质粒通过脂质体共转染SK-MEL-28人黑素瘤细胞株,对照组转染LV5空载体.病毒感染SK-MEL-28,采用荧光显微镜观察感染的效率,Realtime PCR检测igfbp7mRNA的表达,流式细胞术检测对照组及处理组细胞凋亡率.统计数据分析LV5-NC-IGFBP7促黑素瘤凋亡的效能.结果 成功构建LV5-NC-IGFBP7,病毒转染后测定其滴度为1x109 UT/mL,细胞感染率在80％以上,RealtimePCR检测表明处理组igfbp7 mRNA表达高于对照组(P＜0.01),但对照组及处理组凋亡率差异无统计学意义(P＞0.05).结论 靶向IGFBP7的LV5-NC-IGFBP7病毒载体能有效促进igfbp7 mRNA高表达,但促恶性黑素瘤凋亡的效能有待提高.
关键词：病毒载体IGFBP7恶性黑素瘤
分类号：R729.5(小儿其他疾病)
资助基金：广东省医学科研基金项目(A2011441)
论文发表日期：2015-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：3( 32-34 )
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