FGF21腺病毒表达载体的构建及鉴定
严莉莉1
项丽1
庞实锋1
段杏华2
曹定国1
梁朋1
张国平1
丁银润1
胡传银1
1.广东医学院生物学教研室,广东东莞,5238082.广东省惠阳三和医院,广东惠州,516213
摘要:目的 构建成纤维生长因子21(FGF21)表达载体.方法 将FGF21基因克隆到腺病毒穿梭质粒pAd-Track,经DH5α感受态菌扩增,PmeⅠ酶切后热激转化到含腺病毒骨架质粒pAdEasy-1的BJ5183感受态菌内同源重组,经卡那霉素筛选及Pac Ⅰ酶切鉴定,并在DH5α菌中扩增得到Ad-FGF21重组腺病毒质粒,再经Pac Ⅰ酶切线性化后转染到293A细胞包装成重组腺病毒.结果 基因测序结果表明成功合成穿梭载体pAd-Track-FGF21.PCR和酶切鉴定结果证实含FGF21基因的重组腺病毒表达载体构建成功.Ad-FGF21转染293A细胞并制备出高滴度的重组腺病毒.结论 利用腺病毒表达载体获得了携带FGF21的重组腺病毒表达载体.
关键词:腺病毒成纤维细胞生长因子基因治疗
分类号:R587.1(内分泌腺疾病及代谢病)
资助基金:广东省自然科学基金(No.S2012040006272)
论文发表日期:2015-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:6( 39-44 )
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