利用Tet-on系统构建调控APPswe基因表达的SH-SY5Y细胞模型
杨振国
张悠然
廖壮槟
李强
黄洪新
张晶晶
1.广东医学院附属医院,广东湛江,5240012.广东医学院附属医院,广东湛江,5240013.广东医学院附属医院,广东湛江,5240014.广东医学院附属医院,广东湛江,5240015.广东医学院附属医院,广东湛江,5240016.广东医学院附属医院,广东湛江,524001
摘要:目的 利用Tet-On诱导可调控系统构建表达淀粉样前体蛋白突变基因(APPswe)细胞模型.方法 构建重组质粒pTRE-APPswe-Flag,利用慢病毒将其包装转染SH-SY5Y细胞.Puromycin筛选72 h后,通过强力霉素诱导,Western blot检测验证,免疫荧光检测APPswe表达情况.结果 强力霉素诱导后,筛选的细胞Western blot检测Flag标签蛋白表达明显,免疫荧光显示APPswe蛋白表达增加;撤掉强力霉素后,APPswe蛋白表达减少.结论 成功构建了可调控Tet-On-APPswe表达SH-SY5Y细胞系统模型.
关键词:APPsweTet-On系统SH-SY5Y细胞慢病毒
分类号:R741.02(神经病学)
资助基金:国家自然科学基金项目(31370824)广东医学院附属医院青年基金(QK1307)广东省高等学校人才引进专项基金项目(粤财教[2012]328号)
论文发表日期:2015-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:4( 372-375 )
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广东医学院学报

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ISSN:1005-4057
年,卷(期):2015,33(4)
所属栏目:衰老研究