β-Ogg1与H-Ras可溶性原核表达纯化及其相互作用的鉴定
张星亮
谭建新
1.广东医学院附属医院儿科,广东湛江,5240012.广东医学院附属医院儿科,广东湛江,524001
摘要：目的 获得外源表达的可溶性β-Ogg1和H-Ras蛋白并鉴定其相互作用.方法 将β-Ogg1、H-Ras基因构建到含有GST标签的pGEx-4T-2-TEV和6*His标签的pET-28a-TEV原核表达载体上,转化至大肠杆菌BL21(DE3).采用SDS-PAGE检测表达产物,GST介导的Pulldown方法鉴定蛋白相互作用.结果 成功构建了β-Ogg1和H-Ras基因原核表达载体并转化大肠杆菌.在8-oxoG小分子作用下,β-Ogg1与H-Ras有直接相互作用.结论 采用原核表达和亲和层析纯化得到可溶性GST_β-Ogg1 (25-424)和6*His_ H-Ras融合蛋白,并初步证实β-Ogg1和H-Ras存在直接相互作用.
关键词：β-Ogg1H-Ras原核表达
分类号：R346(基础医学)
资助基金：国家自然科学青年基金(31300602)广东省医学科研基金(B2013307)广东省博士启动项目(S2013040012902)广东医学院博士启动项目(XB1341)
论文发表日期：2015-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 389-393 )
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