线粒体自噬受体Nix蛋白的原核表达及其纯化
熊英环1
林千文2
吴湘涛2
张星亮2
1.广东医学院附属医院病理科,广东湛江,5240012.广东医学院附属医院儿科,广东湛江,524001
摘要：目的 获得可用于蛋白晶体筛选的高纯度及构象均一的Nix蛋白.方法 将Nix截断基因构建到原核载体并转化大肠杆菌.异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达后通过GST柱亲和纯化目标蛋白.TEV酶切除GST标签后采用凝胶过滤层析进一步纯化.结果 Nix截断基因成功构建到pGEX-4T-2并诱导表达了目标蛋白.通过GST亲和层析得到了可溶性的携带GST标签的Nix(2～135)蛋白.切除GST标签的Nix(2～135)通过凝胶过滤层析得到了构象均一的单体蛋白.结论 采用原核表达、亲和层析和凝胶过滤层析可获得纯度高且构象均一的单体Nix蛋白.
关键词：线粒体自噬受体Nix载体构建亲和层析凝胶过滤层析
分类号：R651(外科学各论)
资助基金：广东省自然科学基金(No.S2013040012902)国家自然科学基金(No.31300602)广东医学院博士启动基金(No.XB1341)
论文发表日期：2015-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 394-398,402 )
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