富血小板血浆对三维培养中脐带间充质干细胞成骨分化的影响
胡资兵
曾荣
刘田丰
刘志军
1.广东医科大学附属医院骨科,广东湛江,5240012.广东医科大学附属医院骨科,广东湛江,5240013.广东医科大学附属医院骨科,广东湛江,5240014.广东医科大学附属医院骨科,广东湛江,524001
摘要：目的 探讨脐血来源的富血小板血浆(PRP)对三维培养体系中脐带间充质干细胞成骨分化的影响.方法 收集足月健康剖宫产新生儿脐带标本,采用组织块培养法进行脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)的分离培养,观察细胞形态学特征;采用二次离心法提取脐血富血小板血浆和乏血小板血浆(PPP).将PRP作为hUC-MSCs培养添加剂,PPP凝胶作为hUC-MSCs包埋载体.实验分为A组:10％FBS(对照组);B组:10％FBS+ PRP;C组:10％FBS+ PPP凝胶;D组:10％FBS+ PPP凝胶+PRP.培养7d后添加成骨诱导培养基,于第7、14天收集各组细胞上清液,比色法测定各组细胞上清液的碱性磷酸酶(ALP)活性.14d后收集各组hUC-MSCs,RT-PCR测定各组hUC-MSCs成骨相关基因Runx2、ALP和Osteocalcin (OC)的相对表达量.结果 经分离纯化的脐带间充质干细胞接种7d后,各组细胞培养上清中ALP活性的差异无统计学意义;加入成骨诱导培养基7d后,C、D组中ALP活性高于A、B组,D组高于C组(均P＜0.01).与A组比较,C、D组中Runx2、ALP、OC基因表达均明显上调(P＜0.01),其中D组表达最高;B组中Runx2、ALP基因表达提高(P＜0.01),而OC基因表达差异无统计学意义(P＞0.05).结论 PPP凝胶可作为体外培养hUC-MSCs的三维载体;PRP提高hUC-MSCs成骨分化能力.
关键词：脐带间充质干细胞富含血小板血浆乏血小板血浆凝胶成骨分化
分类号：R318(医用一般科学)
资助基金：广东省科技计划项目(2012B031800485)湛江市财政资金科技专项竞争性分配项目(2011D0302)
论文发表日期：2016-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 144-148 )
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