MDR1启动子的克隆及其转录活性的检测
张秀娟1
闫吕彬2
赵聪聪1
陈春玲1
吴嫦丽1
1.广东医科大学生理学教研室 广东湛江5240232.广东医科大学图书馆,广东湛江,524023
摘要：目的 克隆人多药耐药基因1 (MDR1)5'非编码区启动子序列,并检测该段启动子在人肝癌细胞株HepG2中的转录活性.方法 提取HepG2肝癌细胞基因组DNA,PCR扩增人MDR1启动子序列(-1 040～ +288);采用基因重组技术构建由MDR1启动子驱动的荧光素酶报告基因载体,将该载体瞬时转染HepG2细胞,通过双荧光素酶报告基因试剂盒检测该MDR1启动子在HepG2细胞的转录活性.结果 PCR扩增出人MDR1启动子(-1 040～ +288)片段,PCR鉴定、酶切鉴定及测序鉴定均证实该段启动子驱动的荧光素酶报告基因载体构建正确;转染实验证实,转染该质粒的HepG2细胞中荧光素酶活性很高.结论 成功克隆了人MDR1启动子(-1 040～ +288),并证实该MDR1启动子具有较强的转录活性.该启动子的成功克隆为后续研究MDR1基因在药物耐药中作用和基因表达调控机制提供了载体.
关键词：多药耐药基因1启动子克隆转录
分类号：Q782(基因工程（遗传工程）)
资助基金：国家自然科学基金(No.81441118)广东省科技计划(No.2014A020212294)湛江市科技攻关计划(No.2011C3105011)湛江市科技攻关计划(No.2008C01010)
论文发表日期：2016-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 250-253 )
英文信息