Smad家族成员2/3/4原核表达载体构建和融合蛋白纯化
李春艳
林子英
潘展春
邹宝安
刘刚
1.广东医科大学附属医院临床医学研究中心,广东湛江,5240012.广东医科大学附属医院临床医学研究中心,广东湛江,5240013.广东医科大学附属医院临床医学研究中心,广东湛江,5240014.广东医科大学附属医院临床医学研究中心,广东湛江,5240015.广东医科大学附属医院临床医学研究中心,广东湛江,524001
摘要：目的 构建针对Smad家族相关系列原核表达载体,观察其相应蛋白诱导表达纯化情况.方法 PCR扩增Smad2/3/4全长及截短片段,定向插入pGEX-6P-1载体中,构建原核表达重组质粒pGEX-6P-1-Smad2/3/4.经酶切和测序正确后,重组质粒转化表达菌株BL21(DE3),异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达;上清经GST-Sepharose4B亲和纯化,SDS-PAGE考-马斯亮蓝染色鉴定.结果 原核表达载体pGEX-6P-1-Smad2/3/4构建成功,SDS-PAGE证实Smad3A和Smad4存在包涵体,而上清中GST-Smad3(B-D)和GST-Smad2可被纯化.结论 构建的融合蛋白原核表达载体通过诱导和纯化后得到GST-Smad3截断融合蛋白(B-D)和GST-Smad2.
关键词：Smad家族克隆原核表达蛋白纯化
分类号：R575.5(消化系及腹部疾病)
资助基金：国家自然科学基金项目(81570062、8160009)广东省自然科学基金(2016A030313681)广东医科大学科研基金面上培育项目(M2015009)2017年度广东省医学科研基金项目(A2017010)
论文发表日期：2017-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 250-253 )
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