人p54nrb基因真核表达载体的构建及其在HepG2细胞内的表达
陈春玲1
闫吕彬2
牛伢1
吴嫦丽1
张秀娟1
1.广东医科大学生理学教研室,广东湛江5240232.广东医科大学图书馆,广东湛江524023
摘要：目的 构建人54 kDa核DNA、RNA结合蛋白(p54nrb)基因真核表达载体,并观察该载体在人HepG2肝癌细胞内的表达和定位.方法 提取人HepG2肝癌细胞总RNA,RT-PCR扩增人p54nrb基因的蛋白编码序列;采用基因重组技术将该段基因序列亚克隆至pcDNA3-HA真核表达载体中,质粒酶切鉴定和DNA测序证明所构建pcDNA3-p54nrb-HA质粒正确后,将该载体瞬时转染至HepG2细胞,通过细胞免疫荧光方法观察p54nrb在细胞内的表达.结果 酶切和DNA测序结果证明所构建pcDNA3-p54nrb-HA质粒正确;细胞免疫荧光实验可见p54nrb主要表达于HepG2细胞的细胞核.结论 成功构建了人p54nrb真核表达载体,p54nrb主要表达于细胞核.该质粒的构建为后续研究p54nrb基因功能提供了重要载体.
关键词：p54nrb载体克隆表达
分类号：Q782(基因工程（遗传工程）)
资助基金：国家自然科学基金(No.81441118)广东省普通高校重点科研平台和科研项目(No.2018KTSCX082)广东省自然科学基金(No.2019A1515010242)广东医科大学自然科学类重点项目(No.Z2017003)
论文发表日期：2019-12-28
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 615-618 )
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