酵母PHO8与PHO13双基因缺失酵母菌株构建
崔晓静1
杨晓迪1
袁頔2
王俊芳3
崔红晶4
1.广东医科大学医学分子诊断重点实验室衰老研究所,广东东莞 523808;广东医科大学医学技术学院,广东东莞 5238082.广东医科大学,广东东莞 5238083.广东医科大学基础医学院,广东东莞 5238084.广东医科大学医学分子诊断重点实验室衰老研究所,广东东莞 523808;广东医科大学基础医学院,广东东莞 523808
摘要：目的 构建碱性磷酸酶PHO8与PHO13双基因缺失酵母菌株.方法 依据基因同源重组原理,采用一步基因置换法构建编码Pho8蛋白N端60个氨基酸残基(包括跨膜结构域)缺失的PHO8基因缺失酵母(pho8?60)菌株;线性化载体pRS303-pho13-ko转化pho8?60菌株,进一步缺失PHO13基因,构建pho8?60和PHO13双基因缺失(pho8?60pho13?)菌株;通过缺陷型培养基筛选方法,PCR鉴定阳性克隆基因组DNA.结果 pho8?60菌株电泳条带为1151 bp和180 bp,pho8?60pho13?菌株电泳条带分别为1872 bp和174 bp.结论 成功构建pho8?60pho13?酵母菌株.
关键词：酿酒酵母碱性磷酸酶自噬衰老
分类号：Q255(细胞生理学)
资助基金：国家自然科学基金(31701050)国家自然科学基金(81971329)广东省自然科学基金项目(2022A1515010816)广东省医学科研基金(A2022368)广东医科大学博士启动项目(B2017014)国家级大学生创新创业训练计划项目(20201057009)
论文发表日期：2023-02-28
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 7-10,15 )
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