流体剪切力影响成骨细胞生物学功能及分化机制的研究
吕群松
程浩
吴兴达
张延芳
广东医科大学生物医学工程学院,广东湛江 524023
摘要：目的 探讨流体剪切力(FSS)作用下成骨细胞生物学功能及分化机制.方法 4组大鼠成骨细胞分别施加0、30、60和120 min FSS(12 dyn/cm2)刺激,免疫荧光染色后观察FSS刺激成骨细胞不同时间后的细胞骨架变化,采用Image J软件计算细胞分形维数,比较细胞内部复杂程度;使用Ca2+试剂盒检测钙响应,碱性磷酸酶(ALP)测试盒检测ALP活性;Real-time PCR检测FSS刺激不同时间后成骨细胞的BMP2、Runx2、Osterix(Osx)基因表达;Western blot检测FSS刺激不同时间后成骨细胞的BMP2、Runx2、Osx蛋白表达水平,采用Quantity one进行光密度分析.结果 12 dyn/cm2 FSS刺激成骨细胞可引起细胞骨架形态、微丝丰富度及细胞复杂程度的变化,以60 min最明显.与0 min组相比,细胞Ca2+浓度在FSS刺激30 min后明显升高,延续至60 min为高峰平台期(P＜0.05),120 min后Ca2+浓度回落;60 min组的BMP2、Runx2、Osx基因和蛋白表达水平均明显上调(P＜0.01);ALP活性升高,在刺激60 min时最为明显(P＜0.05).结论 12 dyn/cm2 FSS刺激能改善成骨细胞生物学功能,促进BMP2、Runx2、Osx基因及其蛋白表达上调;能通过改变成骨细胞骨架促进Ca2+浓度升高,进而激活与分化高度相关的BMP2-Runx2-Osx信号通路,提高成骨细胞分化标志物ALP活性.
关键词：成骨细胞流体剪切力细胞骨架成骨分化
分类号：Q786(基因工程（遗传工程）)
资助基金：东莞市医疗卫生重点课题(2012105102006)东莞市医疗卫生一般课题(201210515200001)
论文发表日期：2024-04-28
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 135-140 )
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