人血管抑制因子vasostatin片段在大肠杆菌中的融合表达、纯化及活性检测
姚琼凤
王莹
吴晓萍
付小兵
李校堃
1.暨南大学2.暨南大学3.暨南大学4.5.暨南大学
摘要：目的:克隆表达人vasostatin片段,纯化目的蛋白并检查活性,以研究人血管抑制因子vasostatin片段的活性区域.方法:重组构建人vasostatin片段和谷胱甘肽S转移酶(GST)融合表达质粒,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达.通过GST亲和凝胶纯化目的蛋白,用凝血酶(Thrombin)酶切纯化产物获得单体vasostatin片段,并采用MTT法检测其抑制内皮细胞增殖活性.结果:表达产物主要以包涵体形式存在,改变诱导条件可增加可溶性表达量,包涵体形式的表达量约占菌体蛋白总量的55%.活性试验表明,各GST-vasostatin片段和vasoatatin片段具有程度不同的抑制bFGF诱导的内皮细胞增殖的活性,其中以片段vasostatin氨基酸135-164的抑制活性最为显著.结论:人vasostatin片段中氨基酸135-164是抑制内皮细胞增殖活性较强的片段.
关键词：vasostatin片段GST融合蛋白血管生成抑制
论文发表日期：2005-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 29-33 )
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