人表皮角质细胞系培养过程中细胞生物学行为和表型的变化
蔡飒
孙同柱
付小兵
1.解放军总医院第一附属医院全军烧伤研究所创伤与修复重点实验室,北京,1000372.解放军总医院第一附属医院全军烧伤研究所创伤与修复重点实验室,北京,1000373.解放军总医院第一附属医院全军烧伤研究所创伤与修复重点实验室,北京,100037
摘要：目的:获得较高比例的已分化表皮细胞,为表皮细胞去分化研究奠定基础.方法:采用常规表皮细胞培养方法对人表皮角质细胞系(HEK)进行培养和传代.每一代细胞均通过免疫细胞化学染色和Western blot 方法进行表皮干细胞和表皮细胞相应标志物的检测,包括β1整合素、角蛋白19(K19)、角蛋白10(K10)等指标.结果:第1代HEK呈克隆样生长,表皮干细胞标志物β1整合素、K19均有高表达,而K10的表达为阴性.经过数次传代,细胞克隆形成数目减少,细胞逐渐呈分散分布,K10的表达逐渐增高,而β1整合素、K19的表达呈下降趋势,比例减少.细胞培养至第5～6代时,为其生长的一个转折点,即此时细胞增殖能力开始明显降低,但形态良好,K10表达阳性细胞比例明显增高,而β1整合素、K19表达阳性细胞比例迅速降低.细胞培养至10～11代时,为其生长的第二个转折点,此时细胞几乎丧失增殖能力,数量显著减少,体积变大,核浆比明显减小,完全见不到β1整合素、K19表达阳性细胞,K10染色均为阳性.结论:可以选取适当代数的HEK用于去分化研究,为增加HEK的新用途提供了实验基础.
关键词：人表皮角质细胞系细胞培养表皮干细胞已分化表皮细胞去分化
分类号：R3(基础医学)
资助基金：国家重点基础研究发展计划（973计划）(2005CB522603)国家自然科学基金(30672176)
论文发表日期：2007-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 199-201,封3 )
英文信息