碱性成纤维细胞生长因子基因真核表达载体的构建
伊海英1
孙晓艳2
付小兵2
任明姬1
张广田1
高瑗3
1.内蒙古医学院,内蒙古,呼和浩特,0100592.解放军总医院第一附属医院全军创伤修复重点实验室,北京,1000373.总后勤部管理保障局北京郑常庄干休所,北京,100039
摘要：目的:构建碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)基因真核表达载体pEGFP-C3-bFGF,为基因水平研究bFGF在表皮细胞去分化过程中的调控机制提供实验参考.方法:参考分子克隆技术,采用聚合酶链反应(PCR)的方法从PBR322-bFGF质粒中扩增bFGF,同时在其两端引入HindⅢ和EcoR Ⅰ限制性内切酶酶切位点,将bFGF cDNA定向插入pEGFP-C3的多克隆位点中.构建真核表达质粒pEGFP-C3-bFGF,并对重组子进行DNA序列测定.结果:电泳初步鉴定获得的连接产物为重组质粒pEGFP-C3-bFGF;对重组子中含有bFGF基因的一段进行测序,测序结果经Vector NTI软件分析,证实获得bFGF基因.结论:将bFGF插入pEGFP-C3的C末端,可以提高bFGF在真核细胞中的表达,而且不影响其目的蛋白的结构和功能,对研究bFGF调控表皮细胞去分化的分子机制具有重要的意义.
关键词：碱性成纤维细胞生长因子基因表达载体构建聚合酶链反应
资助基金：国家重点基础研究发展计划（973计划）(2005CB522603)
论文发表日期：2008-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：3( 174-176 )
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