髓样相关蛋白14真核表达载体的构建及其细胞内定位研究
刘铮
徐佳
伍丽琼
王娟
邓鹏
姜勇
1.南方医科大学病理生理学教研室,广东省蛋白质组学重点实验室,广东,广州,5105152.南方医科大学病理生理学教研室,广东省蛋白质组学重点实验室,广东,广州,5105153.南方医科大学病理生理学教研室,广东省蛋白质组学重点实验室,广东,广州,5105154.南方医科大学病理生理学教研室,广东省蛋白质组学重点实验室,广东,广州,5105155.南方医科大学病理生理学教研室,广东省蛋白质组学重点实验室,广东,广州,5105156.南方医科大学病理生理学教研室,广东省蛋白质组学重点实验室,广东,广州,510515
摘要：目的:构建小鼠髓样相关蛋白14(MRP14)的真核表达载体,观察其在NIH3T3细胞中的表达定位情况.方法:提取BALB/c小鼠肝脏组织的总RNA,通过逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)扩增得到MRP14编码序列.然后将该编码序列克隆到带有血凝素(HA)标记的载体pcDNA3-HA上,随后转染NIH3T3细胞,在荧光显微镜下观察结果.结果:重组质粒经聚合酶链反应(PCR)、酶切和测序鉴定证明构建正确.转染实验发现,该质粒能够在NIH3T3细胞中表达,表达产物主要定位在细胞质中.结论:成功构建带HA标签的MRP14真核表达载体.该载体能在哺乳动物细胞中有效表达并正确定位,为下一步深入研究MRP14作用细胞的信号通路提供了一个重要工具.
关键词：髓样相关蛋白14血凝素细胞内定位载体构建
资助基金：国家重点基础研究发展计划（973计划）(2002CB513005)长江学者和创新团队发展计划(IRT0731)国家自然科学基金(U0632004)国家自然科学基金(30670828)广东省科技计划(A1090202)
论文发表日期：2008-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 206-209,封2 )
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