去分化表皮干细胞的来源鉴定和分析
张翠萍1
付小兵1
陈鹏2
包晓霞1
孙同柱1
1.解放军总医院第一附属医院全军创伤修复重点实验室,北京,1000482.军事医学科学院放射医学研究所电磁学和激光生物学实验室,北京,100850
摘要：目的:利用染色体特异性分析方法鉴定去分化表皮干细胞的来源.方法:包皮皮片去除皮下脂肪后,中性蛋白酶消化过夜,分离表皮和真皮.分离的表皮片用Ⅳ型胶原反复粘贴并冲洗去除表皮干细胞.处理后的表皮片经免疫组化鉴定无表皮干细胞后移植到雌性BALB/c裸鼠背部全层皮肤缺损创面,5 d后用免疫组化法检测皮片内角蛋白10(CK10)、CK19和β1整合素的表达,然后用Ⅳ型胶原粘贴法分离皮片内去分化来源的表皮干细胞,并采用PCR的方法检测去分化细胞内的Y染色体.结果:未经处理的表皮片基底部细胞呈CK10染色阴性,CK19和β1整合素染色阳性;Ⅳ型胶原处理后的表皮片内细胞全呈CK10染色阳性.而去基底皮片移植后5 d,在皮片的基底侧重新出现CK10染色阴性、CK19和β1整合素染色阳性的细胞.Ⅳ型胶原粘贴分离去分化来源的表皮干细胞,结果表明,移植皮片组在10 min内约有4.56%的贴壁细胞出现,而未移植皮片组3 h内无贴壁细胞出现.PCR分析结果显示在上述贴壁细胞内能检测到Y染色体的特异序列,而宿主来源的组织检测不到.结论:去分化表皮干细胞来源于移植皮片内成熟表皮细胞的去分化,而非宿主体内的干细胞.
关键词：表皮细胞去分化染色体
资助基金：国家重点基础研究发展计划（973计划）(2005CB522603)国家自然科学基金(30672176,30730090,30800442)
论文发表日期：2009-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 205-207,封2 )
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