不同传代次数大鼠骨髓间充质干细胞移植促进糖尿病大鼠创面愈合的研究
赵志力1
雷永红2
隋志甫1
石成方1
杨蓉娅1
1.北京军区总医院全军皮肤损伤修复研究所整形美容中心,北京,1007002.解放军总医院第一附属医院全军创伤修复与组织再生重点实验室,北京,100048
摘要：目的：探讨骨髓间充质干细胞(BMSCs)在体外培养扩增过程中引起的老化对其修复糖尿病慢性创面功能的影响。方法：从大鼠股骨骨髓中分离培养 BMSCs,流式细胞分析仪鉴定细胞表型,成骨、成脂诱导鉴定其分化能力。取第5、15、25、35和45代(P5、P15、P25、P35和 P45)BMSCs,0.25%的胰酶消化后制备1×106/ml单细胞悬液。腹腔注射65 mg/kg链脲佐菌素建立糖尿病 SD大鼠模型,8周后,在 SD大鼠背部左右两侧用打孔器制备直径1.2 c m的圆形创面。将70只糖尿病慢性创面模型大鼠随机分为7组,分别经尾静脉注射1 ml的P5、P15、P25、P35和P45 BMSCs单细胞悬液(1×106/ml),1 ml成纤维细胞(Fb)悬液(1×106/ml)和1 ml生理盐水。分别于伤后3、7、14、21 d计算创面愈合率,并取创面组织制备切片,苏木精-伊红(HE)染色,光学显微镜下观察组织病理学变化及血管生成情况。结果：糖尿病 SD 大鼠创面较正常大鼠创面愈合延迟(P<0.05)。伤后14 d,各 BMSCs移植组与 Fb组和生理盐水组比较,创面收缩与再上皮化明显,镜下可见成纤维细胞生长活跃、数量多,各 BMSCs移植组间无明显差异。伤后14 d,各BMSCs移植组创面愈合率较 Fb组和生理盐水组增加,以 P5 BMSCs移植组变化最显著(P<0.05)。伤后7 d,各 BMSCs 移植组微血管密度均显著高于 Fb组和生理盐水组(P<0.01),以 P5 BMSCs移植组效果最为显著。结论：全身注射异体 BMSCs 可促进糖尿病创面愈合。BMSCs在体外长期扩增传代可减少其创面修复能力,其对糖尿病创面的修复作用以 P5以内干细胞较好。
关键词：骨髓间充质干细胞创面愈合慢性创面糖尿病
资助基金：国家自然科学基金(81171830)国家自然科学基金(30973123)
论文发表日期：2014-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 148-153 )
英文信息