小鼠骨髓源性树突状细胞的体外诱导培养及功能分析
王宏伟
陆江阳
覃家剑
康佳蕊
杨雯
1.解放军总医院第一附属医院病理科,北京,1000482.解放军总医院第一附属医院病理科,北京,1000483.解放军总医院第一附属医院病理科,北京,1000484.解放军总医院第一附属医院病理科,北京,1000485.解放军总医院第一附属医院病理科,北京,100048
摘要：目的：：建立小鼠骨髓源性树突状细胞(DCs)体外培养和扩增方法,为以DCs为靶点的免疫治疗研究提供基础。方法：从C57BL/6小鼠股骨和胫骨中提取骨髓细胞,以含重组小鼠粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF,400 U/ml)和 IL-4(200 U/ml)的 RPMI 1640(含10%FBS)进行诱导培养,于培养第4天加入脂多糖(LPS)继续培养2 d。利用倒置相差显微镜和透射电子显微镜观察细胞生长状态和超微结构,流式细胞术鉴定培养第6天时DCs纯度及免疫表型,流式细胞微球捕获芯片技术检测第2、4、6天培养上清中细胞因子IL-6、IL-10、巨噬细胞趋化因子-1(MCP-1)、干扰素-1(IFN-1)、TNF-α、IL-12 p70含量。结果：重组小鼠 GM-CSF和 IL-4诱导培养小鼠骨髓细胞4 d,加入脂多糖(LPS)继续培养2 d,近90%细胞高表达DCs特征性标志物 CD11c,高表达抗原提呈分子 MHC-Ⅱ和共刺激分子CD86、CD80,具有典型的树突状形态学特征和分泌炎症性细胞因子 IL-6、IL-10、MCP-1、TNF-α和 IL-12p70的功能。结论：小鼠骨髓细胞以重组小鼠 GM-CSF和 IL-4体外诱导培养的 DCs具有较高的纯度,保持了体内的形态学、免疫表型及功能特征。
关键词：骨髓树突状细胞粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子白细胞介素-4
资助基金：国家自然科学基金资助项目(81000848)国家自然科学基金资助项目(81302538)首都卫生发展科研专项基金资助项目(2011-5002-01)首都卫生发展科研专项基金资助项目(2011-5002-02)
论文发表日期：2014-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 199-203 )
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